«Радахлорин», сорбированный на наночастицах перфторуглеродной эмульсии проникает в стволовые клетки

It has been shown that, upon incubation of mouse bone marrow stem cells (BMSC) in vitro with the nanoparticles of perfluorocarbon (PFC) emulsion stabilized by proxanol 268, these nanoparticles penetrate into cells and stay there for a long time (up to 20 days of observation).

It has been found that, under in vitro conditions, mouse BMSC loaded with both the nanoparticles of the original emulsion and the nanoparticles of the emulsion preliminarily incubated with radachlorine do not differ from control stem cells in the rate of division, stretching on a plastic support, and the formation of a monolayer.

It has been shown that the exposure to laser radiation of BMSC incubated with the nanoparticles of a PFC emulsion preliminarily incubated with radachlorine under in vitro conditions leads to the death of these cells due to the destruction of the cell membrane. The treatment with laser radiation of BMSC incubated with the nanoparticles of the starting PFC emulsion (without preliminarily incubation with radachlorine) causes no death of these cells.


Целью настоящей работы было выяснить возможность сорбции лекарственного препарата (ЛП) «Радахлорина» (РД) на наночастицах (НЧ) перфторуглеродной (ПФУ) эмульсии, стабилизированной проксанолом 268; включения наночастиц с Радахлорином в стволовые клетки (СК) костного мозга. Препарат Радохлорин под действием лазерного облучения образует активные формы кислорода, вызывающие гибель клеток.

Материалы и методы.

В работе использовались НЧ ПФУ эмульсии, состоящие из смеси перфторуглеродов: перфтордекалина (ПФД) и перфторметилциклогексилпипередина (ПФМЦП) в соотношении 9:1, 10 об%, стабилизированных 4% раствором проксанола 268.

Радахлорин добавляли к эмульсии ПФУ в соотношении 5 мг/мл. В качестве доноров СК были использованы мыши линии C57black. Клетки выделяли из бедренной кости и культивировали в течение 5 дней при 37°С в среде DMEM с ростовыми факторами. После 5 дней культивирования к клеткам добавляли НЧ исходной эмульсии, либо НЧ, содержащие сорбированный на них РД, и инкубировали в течение 30 минут при 37°С. Затем клетки 5-кратно отмывали раствором Хенкса и помещали в термостат для дальнейшего культивирования.

Клеточную культуру, содержащую Радахлорин внутри СК, облучали лазером (662 нм) мощностью 1 Дж в течение 1 минуты. Затем в видимом свете проводили фотографирование в течение 3 минут с интервалом 15 секунд.

Результаты.

НЧ, содержащие лекарственный препарат Радахлорин, проникают в СК, где препарат сохраняет свою активность в течение 20 суток наблюдения. СК, содержащие наночастицы с РД, при культивировании в условиях in vitro морфологически не отличаются от контроля. Воздействие лазерного излучения на клетки, содержащие наночастицы ПФУ эмульсий с РД в условиях in vitro, приводит к образованию активных форм кислорода и гибели клеток путем разрушения мембраны в течение 20 суток наблюдения.


¹Темнов А.А., ²Склифас А.Н., ³Терещенко А.В., ³Белый Ю.А., ³Лысков Н.Б., ²Кукушкин Н.И.
¹НИИ Скорой Помощи им. Н.В. Склифосовского; Москва, ²Учреждение РАН ИБК, г. Пущино, ³МНТК «Микрохирургия глаза» им. академика С.Н. Федорова, г. Калуга