В Самаре с 2003 г. начал свою работу по заготовке, криохранению образцов пуповинной крови (ПК), научно-исследовательской работе в области клеточных технологий ГУП "Поволжский банк гемопоэтических клеток". Губернатором К.А. Титовым и министерством здравоохранения Самарской области поставлены следующие задачи: организация публичного банка стволовых клеток ПК с лабораторией культивирования в соответствии с международными стандартами для интеграции в международную сеть банков, внедрение новых клеточных технологий в Самарской области для повышения качества медицинской помощи.
Цель исследования - оценить первый этап внедрения новых клеточных технологий. Изучить влияние различных факторов (масса, рост плода, шкала Апгар, срок гестации) на объем собранной пуповинной крови (ПК) и количество ядросодержащих клеток (ЯСК). Сравнить способы обработки ПК.
Забор ПК осуществляется в 4-х родильных домах г. Самары. Все женщины - доноры пуповинной крови подписывают информированное согласие, проходят тщательный дородовый скрининг на наличие показаний и противопоказаний к донорству пуповинной крови, а также обследование на наличие гемотрансмиссивных инфекций. 550 образцов пуповинной крови было подвергнуто обработке двумя методами: двойного центрифугирования с HES и автоматическим методом на клеточном сепараторе Sepax. Проводилось сравнительное исследование форменных элементов крови до и после обработки пуповинной крови.
Мы провели корреляционный анализ (n=102) зависимости объема собранной ПК от массы (r=0,268; р<0,01) и роста плода (r=0,203; р<0,05), шкалы Апгар (r=-0,092; р>0,1), срока гестации (r=-0,003; р>0,1), а также анализ зависимости количества ЯСК в образце ПК от объема собранной ПК (r=0,102; р>0,1) от массы (r=0,073; р>0,1), роста плода (r=0,121; р>0,1), срока гестации (r=0,159; р>0,1), шкалы Апгар (r=-0,174; р>0,1). При ручном методе обработки ПК выход ЯСК составил 71,9±6,7%, при автоматическом методе - выход ЯСК 81+8,0%, (р<0,05), выход мононуклеаров - 90,1+6,7%. Процент удаления эритроцитов составил 73±5,7 и 83,5±6,1% (р<0,05), соответственно.
Таким образом, имеется слабая корреляционная связь между объемом собранной пуповинной крови массой и ростом плода; шкала Апгар и срок гестации не влияют на величину объема. Количество ЯСК в образце пуповинной крови не зависит от объема собранной крови, массы, роста плода, шкалы Апгар и срока гестации. Автоматический метод обработки пуповинной крови обеспечивает больший выход ЯСК и удаление эритроцитов, по сравнению с ручным методом, значительно сокращает время работы, а также сводит к минимуму риск контаминации. Отработанная методика по заготовке, обработке и криохранению образцов пуповинной крови является первым шагом внедрения новых клеточных технологий в Самарской области.
Тюмина О.В.1, Котельников Г.П.2, Гусарова Г.И.3, Гридасов Т.Н.4
ГУП Самарской области "Поволжский банк гемопоэтических клеток" 1,
ГОУВПО "Самарский государственный медицинский университет" 2,
Министерство здравоохранения Самарской области 3,
Самарская областная клиническая больница им. М.И. Калинина 4