RSS | PDA | XML




Полезное




Аренда юрадрес
Поиск и хостинг видео Аренда квартир и офисов
megaudit.ru

Терапевтический эффект аутотрансплантации стволовых клеток периферической крови




Терапевтический эффект аутотрансплантации стволовых клеток периферической крови у пациентов с хроническими облитерирующими заболеваниями артерий нижних конечностей

Introduction. Chronic obliterative lower limb diseases (COLLD) are characterized by progressive tissue ischemia, resulting in invalidization of patients. Preclinical studies revealed high efficiency of stem cells transplantation for COLLD. The aim of our work was to study the clinical efficiency and mechanisms of autologous stem cells therapy of COLLD. Our work was performed within the framework of Republic Program «Development of Cellular Medicine in Tatarstan in 2008» in Republic Clinical Hospital.

Materials and methods. The study was performed on gastrocnemius muscle biopsies of 30 patients with COLLD. The biopsies were taken before intramuscular injection of autologous peripheral blood stem cells, mobilized by granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) and 3 months after the procedure. The paraffin-embedded slices were stained immunohistochemically with antibodies against endothelium markers - CD31, CD34, von Willebrand factor (vWF) to demonstrate capillary network and to myogenin — marker of myosatellites. Morphological analysis was carried out; the number of skeletal muscle fibers and capillaries were counted to avoid over- or underestimation of capillary density due to myocyte atrophy or interstitial edema. To objectify ischemia rate before and after therapy, ankle-brachial index (ABI) estimation, tredmill test and digital subtraction aortoarteriografy were performed. Statistics was presented as mean value ± SD.

Results. We showed that autologous stem cell injection induces increase of «capillary/muscle» ratio (25%, p<0,001). In muscle biopsies before injection we found single myogenin+ cells, number of these cells after treatment was increased. After autologous transplantation we revealed cells with myogenin+ nuclei as the sign of late differentiation of myosattelites. These cells fused to myotubes and built new muscle fibers.

We marked significant improvement of clinical findings: ABI increased by 12%) (0,59±0,04 before and 0,66±0,04 after 3 months, p=0,001), painless walking distance increased by 26,5% from 102,2±11,55 m to 129,4±11,13 m, p<0,001), ABI restoring time decreased by 32,2%) (627,3±66,9 before and 425,0±58,2 after injection, p=0,003). Arteriograms showed formation of the new collaterals.

Conclusion: Autologous transplantation of peripheral blood stem cells differentiate into endothelial cells, stimulate microvasculation and activation of myosatellites, which build new muscle fibers. Autologous peripheral blood stem cells transplantation showed high efficiency for treatment of patients with COLLD.


Введение.

В последние годы все большее значение приобретают хронические облитерирующие заболевания артерий нижних конечностей (ХОЗАНК). Доклиническими исследованиями доказана высокая эффективность клеточной терапии ХОЗАНК.

Целью нашего исследования стало изучение клинической эффективности терапии аутогенными стволовыми клетками периферической крови (СКПК) больных ХОЗАНК и выявление лежащих в её основе морфофункциональных механизмов. Исследование проведено в 2008-2009 гг. на базе Республиканской Клинической Больницы МЗ Республики Татарстан в рамках Республиканской программы «Внедрение клеточной медицины в Республике Татарстан в 2008 году».

Материалы и методы.

Парафиновые срезы биоптатов икроножной мышцы пораженной конечности 30 больных ХОЗАНК до начала терапии и через 3 месяца после внутримышечного введения мобилизованных аутогенных СКПК окрашивали иммуногистохимически с антителами к маркерам эндотелия (CD31, CD34, фактор фон Виллебрандта), а также с антителами к миогенину - маркеру миосателлитов. Далее производили морфометрический анализ образцов, подсчитывали число мышечных волокон и капилляров и определяли их соотношение. Для объективизации степени ишемии до и после введения СК мы определяли лодыжечно-плечевой индекс (ЛПИ), выполняли стандартный тредмил-тест, тетраполярную реографию, дигитальную субтракционную аортоартериографию. Обработку данных производили с применением статистического графического пакета Statistica 8.

Результаты исследования.

Результаты иммуногистохимического окрашивания показали рост соотношения «число капилляров/число мышечных волокон» на 25% (р<0,001). В биоптатах мышечной ткани до введения стволовых клеток мы наблюдали единичные миогенин-позитивные клетки, их число увеличивалось через 3 месяца после трансплантации, появлялись клетки с миогенин-позитивными ядрами, что является признаком поздних стадий дифференцировки миосателлитов. Также мы наблюдали слияние клеток с образованием миотуб и новых мышечных волокон.

Отмечено улучшение состояния пациентов по данным инструментальных исследований, выражающееся в приросте показателей по данным функциональных проб. Показатели ЛПИ увеличились на 12% (0,59±0,04 исходно и 0,66±0,04 на сроке 3 мес., р=0,001). Увеличение дистанции безболевой ходьбы составило 26,5% (с 102,2±11,55 метров до 129,4±11,13 метров, р<0,001). Время восстановления ЛПИ при выполнении тредмил-теста на сроке 3 месяца снизилось на 32,2% (с 627,3±66,9 до 425,0±58,2 сек, р=0,003). Показатели тетраполярной реографии не имели достоверных различий. На контрольных артериограммах мы отметили рост коллатеральной сети, однако оценить степень роста не позволило отсутствие достоверных статистических критериев.

Вывод.

Аутотрансплантация СК ПК ведет к улучшению васкуляризации ишемизированной конечности путем неоангиогенеза, активации миосателлитов и формированию новых мышечных волокон, что способствует восстановлению функции ишемизированной конечности.


1Мавликеев М.О., 1Табанакова А.В., 1Трондин А.А., 1Певнев Г.О., 1Курганова Г.Р., 1Газизов И.М., 2Плотников М.В., 2Максимов А.В., 1Гумерова А.А., 1Киясов А.П.
1Казанский Государственный Медицинский Университет, 2Республиканская Клиническая Больница МЗ Республики Татарстан, г. Казань




Комментировать:
Имя:

Сообщение:


Похожие статьи:

Экспериментальная оценка остеоиндуктивности рекомбинантного костного морфогенетического белка

Категории: Клеточные технологии, Тканевая инженерия,
Вестник травматологии и ортопедии им. Н.Н. Приорова №4 2010 Миронов С.П., Гинцбург А.Л., Еськин Н.А., Лунин В.Г., Гаврюшенко Н.С., Карягина А.С., Зайцев В.В. Экспериментальная оценка остеоиндуктивности..

Клеточные технологии в лечении дегенеративно-дистрофических заболеваний костей и суставов

Категории: Клеточные технологии,
Несмотря на полиэтиологичность дегенеративно-дистрофических заболеваний костей и суставов, их патогенез почти при всех поражениях имеет васкулярную природу. В основе известных хирургических методов..

Результаты трансплантации стволовых нейрогенных клеток при повреждениях спинного мозга

Категории: Клеточные технологии,
Цель. Изучить эффективность метода трансплантации стволовых нейрогенных клеток при травме спинного мозга в отдаленном периоде. Материал и методы. За период с 2005 по 2010 годы у 16 больных применен..

Применение композиции аутогенных стромальных клеток и гидроксиапатита

Категории: Клеточные технологии,
Применение композиции аутогенных стромальных клеток и гидроксиапатита для восстановления объема альвеолярного отростка верхней и нижней челюстей The use of the autologous stromal cells and hydroxiapatite..

Терапевтический потенциал клеток пуповинной крови у пациентов с неврологическими заболеваниями

Категории: Клеточные технологии,
In the course of clinical trials carried out in medical institutions in Moscow and St-Petersburg the safety and efficacy of intravenous infusion of allogeneic ABO/Rh-compatible human cord blood cells..