In accordance with the Ministry of Health's Order № 325 «About the developing of cells technologies», 25 June 2003, 390 samples of cord blood were tested in the Stem Cell Bank Pokrovski using the ELISA method in order to determine anti-HIV 1 and 2, p24 HIV1, anti-HTLVI and II, anti-HBcorAg, HBsAg, anti-HCV, anti-CMV, anti-Toxoplasma gondii, RW. Microbial contamination was analyzed using a system permissive for the growth of aerobic and anaerobic bacteria and fungi. 380 samples of the explored 390 samples were considered fit for storage and usage.
В соответствии с требованиями приказа № 325 от 25 июля 2003 г «О развитии клеточных технологий в РФ» каждый образец пуповинной крови (ПК) должен быть проверен на присутствие инфекционных агентов - антигенов инфекционных агентов или антител к ним: Anti-HIV1 и 2, HIVl-Ag, Anti-HTLV-I и -II, Anti-HBcor-Ag, HBs-Ag, Anti-HCV, Anti-CMV, Anti-Toxoplasma gondii, RW и микробиологическую контаминацию Staphilococci, Streptococci, Enterococci, Neisseria gonorrheae, Candida species, Aspergillus species, Esherihia coli.
Для выявления маркеров инфекционных агентов в плазме ПК использовали метод иммуноферментного анализа (ИФА) и ID-PaGIA, для исследования образцов ПК на микробиологическую контаминацию - системы, подготовленные для роста аэробных и анаэробных бактерий и грибов (гемокультура) и в случае наличия аэробных бактерий - антибиотикограмму.
Результаты проведенных исследований показали, что антитела к HBcorAg выявлялись у 2%, к НСV - у 0%, к CMV - у 60%, к T.gondii - у 4%, одновременное выявление антител к CMV и T.gondii - у 17%. Отсутствие положительных результатов по выявлению антител к HIV 1 и 2, антигену р24 HIV1 и HBsAg обусловливается изоляцией матерей инфицированных HIV и HBV по эпидемическим показаниям. Методом ID-PaGIA в образцах пуповинной крови в двух случаях были выявлены антитела к T.pallidum, при этом RW оставалась отрицательной. В анамнезе пациентов имелись свидетельство о лечении от заболевания, вызываемого T.pallidum. Антитела к HTLV I и II в исследованных образцах не выявлялись. Ни один из перечисленных маркеров не был выявлен у 17% исследованных образцов ПК.
Патогенная микрофлора и грибы не были обнаружены ни в одном из образцов. Условно-патогенная микрофлора выявлена и идентифицирована в 7% образцов. Антибиотикограмма была составлена для всех выявленных аэробных бактерий таким образом, чтобы образец ПК можно было использовать для трансплантации.
Исходя из описанного выше, в общественный регистр доноров ООО «Покровский банк стволовых клеток» отобрано 380 образцов концентрата стволовых клеток пуповинной крови человека, не содержащих Анти-HIV-l и -2, HIV-1Ag, Анти-HTLV-I и -II, Анти-HbcorAg, HBs-Ag, Анти-HCV и удовлетворяющих требованиям приказа № 325.
Смолянинов А.Б., Масленникова И.И., Супильникова О.В., Иволгин Д.А., Адылов Ш.Ф.
Покровский Банк Стволовых Клеток, Санкт-Петербург