Presented project is aimed to work out materials and method of keratinocyte culturing for burns treatment by cell monolayer transplantation on resorbable film substrates.
In our study we used biodegradable polymers - poly (DL-lactide) (PLA). We modified surfaces of PLA substrates by coating with collagen e.
The effect of the improved surface by treating methods was estimated by means of scanning electron microscopy (SEM) different analytical chemistry methods. The cell affinity of the PLA matrix before and after the surface modification was also evaluated on cell morphology and spreading of cultivated keratinocytes and actin cytoskeleton.
Восстановление поврежденного кожного покрова с помощью клеток эпидермиса - кератиноцитов, в настоящее время используется в медицинской практике. Однако, не смотря на клиническое использование, существуют недостатки этого метода. Один из таких недостатков является обработка клеток протеолитическими ферментами. Часть адгезионных рецепторов при этом повреждается. Перенос клеток вместе с матрицей позволит исключить процедуру обработки клеток ферментами.
Целью данной работы является разработка биодеградируемых матриц, предназначенных для культивирования и трансплантации клеток кожи человека.
Такой материал должен быть нетоксичен, биодеградируем и способствовать клеточной адгезии и пролиферации.
Этим требованиям отвечает полимер на основе молочной кислоты - поли (D, L-лактид). Однако, гидрофобный характер поверхности матриц, приготовленных на его основе, требует дополнительной модификации.
Модификацию матриц проводили путём нанесения на их поверхность белка внеклеточного матрикса - коллагена. На интактные и модифицировнные матрицах культивировали кератиноциты. С помощью методов сканирующей электронной, иммунофлюоресцентной и световой микроскопий оценивали количество клеток и степень их распластанности. Показано, что предложенные методы нанесения коллагена увеличивают адгезию и пролиферацию клеток на поверхности.
1.2Швед Ю.А., 1Кухарева Л.В., 1Блинова М.И., 2Билибин А.Ю., 1Пинаев Г.П.
1Институт цитологии РАН, 2Санкт-Петербургский Государственный Университет, Санкт-Петербург