HLA-типирование образцов пуповинной крови при создании регистра доноров в Санкт-Петербурге

Umbilical Cord Blood (UCB) is a rich source of hematopoietic stem cells (HSC) used for transplantation. Matching of stem cells donor to a recipient is determined by comparing their tissue types, also known as their Human Leucocytes Antigen (HLA) types. HLA Lab at Stem Cell Bank Pokrovski, St. Petersburg, has matched more than 63 units of CB, using SSP (sequence-specific priming) method. The results of low resolution HLA-typing could be applied to primary selection of donors when it needs transplant of HSC. Also it significantly simplifies the high resolution typing operation. Advantages of the own HLA-identified cord blood register in Russia are accessibility and decreasing of cost of samples. But the major excellence is raise of chance of HLA-matching in the same population.


Пуповинная кровь является одним из важнейших источников гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) и в определённых случаях её применяют в качестве альтернативы трансплантации костного мозга. Трансплантации клеток пуповинной крови производятся у больных с самыми различными заболеваниями опухолевой и неопухолевой природы: при лейкозах и миелодиспластическом синдроме, при апластической анемии, а также при некоторых врожденных заболеваниях (синдроме Барра, талассемиях и др.). Технология трансплантации хорошо отработана, однако на сегодняшний день главной задачей является поиск донора, чьи клетки будут совместимы с организмом пациента. Известно, что при трансплантации ГСК необходимо совпадение донора и реципиента по системе HLA (Human Leucocyte Antigen). При аллогенных трансплантациях пуповинной крови наилучший результат достигается при несоответствии образца реципиенту не более чем по 2 аллелям антигенов HLA, либо при полной HLA-совместимости.

Для осуществления неродственных трансплантаций необходимо наличие большого количества типированных образцов пуповинной крови, чтобы была возможность подбора идентичного донора. Для этого требуется создание больших хранилищ, в которых будут находиться различные по HLA-антигенам образцы пуповинной крови.

В настоящее время ООО «Покровский банк стволовых клеток» создаёт первый в России регистр доноров пуповинной крови, который поможет решить проблему дефицита образцов для трансплантации.

В ходе работы было проведено HLA-типирование 63 образцов пуповинной крови методом SSP (sequence-specific priming). ДНК выделяли из 0,7 мл цельной крови. Для выделения использовали набор Protrans DNA Box 500 (Protrans, Германия). Детекцию локусов HLA-A, HLA-B и HLA-DRB1 проводили с использованием циклерплатной системы Protrans HLA-A*,-B*,-DRB1* (Protrans, Германия).

В процессе исследования были выявлены следующие наиболее часто встречающиеся генотипы: HLA-A*02 - 33%, *24 - 15%, *01 - 12%; HLA-B*07 - 13%, *35 - 10%, *13 - 9%, HLA-DRB1*07 - 20%, *15 - 19, *13 - 14%.

Результаты HLA-типирования образцов регистра доноров пуповинной крови низкого разрешения могут быть использованы при первичном подборе донора, когда возникает необходимость в трансплантации ГСК. При совпадении донора и реципиента по 4 из 6 и более HLA-антигенам, определенным по низкому разрешению, проводится секвенирование образцов по локусу DRB1. Главным преимуществом наличия собственного регистра доноров пуповинной крови в России помимо доступности и уменьшения стоимости материала для трансплантации является то, что вероятность совпадения HLA-генотипа среди одной популяции гораздо выше, чем при поиске в мировом регистре.


Котелевская Е.А., Смирнова С.А., Новицкий А.В., Смолянинов А.Б., Иволгин Д.А.
ООО «Покровский банк стволовых клеток», Санкт-Петербург