Бактериологические исследования костных фрагментов биотканей до стерилизации

Microbial contamination of donor bone fragments was studied after non-sterile procurement and before sterilization. The study results showed that microbial landscape was presented by gram-positive microflora and yeast cultures. Pathogenic gram-negative microflora was not identified. Medical products prepared from such bone fragments are pyrogen-free.


Представляет интерес изучение микробной флоры посмертных костных тканей до стерилизации. По данным литературы контаминация грамотрицательными микроорганизмами до периода стерилизации, уже после стерилизации и при наличии отрицательных бактериологических посевов может спровоцировать пирогенную реакцию пациента. Основным источником пирогенных примесей в материале является комплекс эндотоксина с белком грамотрицательных бактерий, который входит в состав наружной мембраны клеток.

Цель исследования.

Изучение микробной контаминации донорских костных фрагментов при нестерильной заготовке.

Материалы и методы.

Материалом для исследования являлись 120 образцов аллогенных костных фрагментов от 12 доноров.

Бактериологические методы исследования:

• Микроскопические (окраска препаратов);
• Культуральные (высев на элективные питательные среды, определение культуральных свойств);
• Биохимические (определение биохимических ферментативных свойств).

Было выявлено три варианта морфологической картины: грамположительная споровая палочка, грамположительные кокки и дрожжеподобные грибы.

На втором этапе исследования, в зависимости от морфологии микроорганизмов, производились высевы на элективные питательные среды для выделения чистых культур. По результатам морфологического исследования в качестве элективных питательных сред использовали: желточно-солевой агар, агар Сабуро, агар для выделения энтерококков. На третьем этапе исследования проводилась идентификация микроорганизмов до вида.

Биохимическую идентификацию проводили на основании способности штаммов ферментировать глюкозу, мальтозу, сахарозу, лактозу.

Результаты. В результате проведенного исследования была выявлена выраженная контаминация дрожжевыми культурами - 79,16%, грамположительной споровой палочкой - 91,7%, диплококками Enterococcus spp. - 33,3%, St.epidermidis - 8,3%, St.Saprophiticus - 8,3%.

Материал только от 1 донора был обсеменен St. Saprophytics, St. Epidermidis, в то время как диплококки Enterococcus spp. (Е. faecalis, Е. faecium) выявлены в пробах у 4 доноров. Грамположительная споровая палочка и дрожжевые грибки наблюдались у 11 доноров практически в большей части проб.

Все биоткани имели исходный уровень контаминации, характерный для окружающей среды. Несмотря на практику нестерильной заготовки тканей, патогенных возбудителей выявлено не было.

Выводы.

Таким образом, на первый план в микробном пейзаже донорских костных фрагментов выходит сапрофитная микрофлора, которая в нормальных условиях не является патогенной для человека. Изделия медицинского назначения (ИМН), приготовленные из таких костных фрагментов при условии адекватной стерилизации являются не только стерильными, но и апирогенными.


Кирилова И.А., Подорожная В.Т., Новоселов В.П., Бакиров Т.С.
ФГУ «Новосибирский НИИТО Росмедтехнологий», г. Новосибирск